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科學(xué)研究工作對(duì)更高圖像分辨率的追求產(chǎn)生了激光掃描共聚焦顯微鏡。隨著免疫熒光技術(shù)在生物學(xué)研究領(lǐng)域的廣泛應(yīng)用,研究人員注意到,熒光顯微照片的分辨率較低,傳統(tǒng)的熒光顯微鏡使用場(chǎng)光源,因標(biāo)本鄰近結(jié)構(gòu)(細(xì)胞或亞細(xì)胞結(jié)構(gòu))產(chǎn)生的衍射光和散射光的干擾,使標(biāo)本中細(xì)微結(jié)構(gòu)的成像不夠清晰。激光共聚焦顯微鏡的主要原理是利用激光掃描束通過光柵針孔形成點(diǎn)光源,在熒光標(biāo)記標(biāo)本的焦平面上逐點(diǎn)掃描,采集點(diǎn)的光信號(hào)通過探測(cè)針孔到達(dá)光電倍增管(PMT),再經(jīng)過信號(hào)處理,在計(jì)算機(jī)監(jiān)視屏上形成圖像。由于激光光源的光柵針孔和探測(cè)針孔對(duì)物鏡焦平面是共軛的,焦平面上的點(diǎn)同時(shí)聚焦于光柵針孔和探測(cè)針孔,進(jìn)行點(diǎn)掃描時(shí),掃描點(diǎn)以外的點(diǎn)不會(huì)成像,經(jīng)逐點(diǎn)掃描后才形成整個(gè)標(biāo)本的光學(xué)切片(Optic section
